Maxiprep para plásmidos de alta pureza por precipitación en sílice (D1061)
Componentes
Componentes | D1061 (10 preps) |
RNasa A (10 mg/ml) | 600 μl x2 |
Solución I | 100 ml |
Solución II | 100 ml |
Solución III | 120 ml |
Tampón de lavado PB | 120 ml |
Tampón de lavado W | 40 ml x 3 |
Tampón de elución | 20 ml |
Solución en polvo de sílice | 12 ml |
Características
Tiene contenido par ahacer hasta 10 preparaciones
Alto rendimiento: 100 ml de suspensión producen entre 400-1,000 μg de ADN plasmídico de alta calidad.
Alta pureza: A260/A280=1.7-1.9. Sin cloroformo ni fenol, lo cual es seguro para la gente.
Flexibilidad: ampliación o reducción sencilla.
Almacenamiento
ARNasa A: conservar a -20ºC. Antes de empezar, añadir ARNasa A a la Solución I, mezclar bien y almacenar a 4ºC.
Los demás reactivos pueden ser almacenados a temperatura ambiente.
Si se forman precipitados en las soluciones de tampón durante su almacenamiento, se deben disolver mediante incubación a 37ºC antes de su uso.
Principio
Este método se basa en la adsorción de sílice, las partículas de sílice se unen al ADN plasmídico de forma selectiva a una alta concentración de sales y un pH bajo, mientras que proteínas y otros contaminantes son eliminados mediante lavado. El ADN puro es eluido con tampón TE o agua. Este método requiere de pocas manipulaciones y es más rápido y fácil de realizar que otros métodos orgánicos de extracción. El ADN purificado es apto para todos los procesos comunes de biología molecular, incluyendo digestión por enzimas de restricción, clonación, secuenciación, etc.
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