Proteinasa K (Polvo Liofilizado) (D3011,D3012)
Proteinasa K (Polvo Liofilizado) (D3011,D3012)
Descripción
La proteinasa K es una proteasa endolítica que escinde los enlaces peptídicos de los lados carboxílicos de los aminoácidos alifáticos, aromáticos o hidrofóbicos.
La proteinasa K se clasifica como serina proteasa. El péptido más pequeño hidrolizado por esta enzima es un tetrapéptido.
Características
Activa en una amplia gama de productos de reacción.
Actividad específica: 40 U/mg de proteína.
Forma: Contiene 100 mg de proteinasa K, polvo liofilizado.
Active in a wide range of reaction products
Specific Activity: 40 U/mg protein
Form: Contains 100 mg Proteinase K, Lyophilized Powder
Aplicaciones
Aislamiento de ADN genómico de células y tejidos cultivados.
ELiminación de ADNasas y ARNasas al aislar ADN y ARN de tejidos o líneas celulares.
Determinación de la localización enzimática.
Mejora de la eficacia de la clonacion de productos de PCR
Control de Calidad
Actividad ADNasa: Ninguna actividad enzimática detectable con λ ADN después de 6 horas de incubación a 37ºC.
Actividad ARNasa: Ninguna actividad de ribonucleasa detectable después de 16 horas de incubación a 25ºC.
Fuente
Células de Pichia pastoris con un gen clonado que codifica la proteasa endolítica de Tririachium album (Proteinasa K).
Peso Molecular
28,9 kDa el monómero (6).
Dilution Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 7.5), containing 5 mM calcium chloride and 50% (v/v) glycerol.
Definición de la unidad de actividad
Una unidad de enzima libera aminoácidos y péptidos Folina-positivos correspondientes a 1 µmol de tirosina en 1 min a 37 ° C utilizando hemoglobina desnaturalizada como sustrato. La actividad enzimática se determina en la siguiente mezcla: fosfato potásico 0,08 M (pH 7,5), urea 5 M, NaCl 4 mM, CaCl2 3 mM y hemoglobina 16,7 mg / ml.
Almacenamiento
Para un almacenamiento prolongado, almacene la proteinasa K liofilizada a 4 ºC y el tampón de dilución a -20 ºC. Las soluciones disueltas deben almacenarse a -20 ºC.
Inhibición e inactivación
La proteinasa K no se inactiva por quelantes de metales, por reactivos con tiol ni por inhibidores específicos de tripsina y quimiotripsina.
Inactivado por calentamiento a 95ºC durante 10 minutos.
Nota
Actividad óptima de 50-55ºC.
La desnaturalización rápida de la enzima ocurre a temperaturas superiores a 65ºC.
La concentración de trabajo recomendada para la proteinasa K es de 0,05 a 1 mg/ml. La actividad de la enzima se estimula con SDS al 0,2-1% o con urea 1-4 M.
El Ca2+ protege la proteinasa K contra la autolisis, aumenta la estabilidad térmica y tiene una función reguladora para el sitio de unión al sustrato de la proteinasa K.
Estable en un amplio rango de pH: 4,0-12,5 ; pH óptimo 7,5-8,0.
Cantidad | 100mg (D3011), 1g (D3012) |
---|
There are no reviews yet.