SYBR Green qPCR Mix (High Rox+) (P4031, P4032)
SYBR Green qPCR Mix (High Rox+) (P4031, P4032)
2x SYBR® Green qPCR Mix (High Rox +) está diseñado para PCR en tiempo real de alto rendimiento. El kit contiene una ADN polimerasa Taq diseñada mediante un proceso de evolución molecular. El resultado es una enzima única, diseñada específicamente para qPCR utilizando la química del colorante SYBR® Green I.
2x SYBR® Green qPCR Mix (High Rox +) es una premezcla conveniente de los componentes (excepto cebadores, ADN molde y agua) necesarios para realizar la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real utilizando el colorante SYBR® Green I con mayor sensibilidad y especificidad. El colorante SYBR® Green se une al ADN bicatenario (ds), proporcionando así una señal fluorescente que refleja la cantidad de producto de ADN bicatenario generado durante la PCR. Este reactivo se utiliza en la amplificación y detección de ADN en qPCR en instrumentos ABI en tiempo real que apoyan la normalización con colorante de referencia de alto Rox a una concentración final de 500 nM.
Contenido
P4031
2 x SYBR qPCR Mix (High Rox+) | 1 ml |
Nuclease-Free Water | 1 ml |
P4032
2 x SYBR qPCR Mix (High Rox+) | 1 ml x 5 |
Nuclease-Free Water | 1 ml x 5 |
KCl 100 mM, MgCl2 5 mM, dNTP 400 μM, ADN polimerasa Hot Start Taq de 0,1 U / μl, 1x SYBR® Green, tinte de referencia Rox al 2% y otros componentes de tampón optimizados.
Características
- Este reactivo se puede utilizar en sistemas ABI en tiempo real que requieren una alta concentración de colorante de referencia Rox.
- La tecnología Hot Start con anticuerpos anti-Taq ADN polimerasa permite una alta especificidad y una amplificación reproducible.
Detección
- Este reactivo se puede utilizar en dispositivos de detección generales, como: LineGene (Bioer Technology co., Ltd.)
- Este reactivo también se puede utilizar en equipos de detección mediante capilares de vidrio o referencia pasiva, como:
LightCycler (Roche Molecular Systems)
ABI PRISM® 7000, 7700 y 7900 (Applied Biosystems)
Nota: El modo de referencia pasiva de los detectores debe establecerse en “ROX”.
Directrices para prevenir la contaminación de la reacción de PCR
Durante la PCR se generan más de 10 millones de copias de ADN molde. Por lo tanto, se debe tener cuidado para evitar la contaminación con otras secuencias y amplicones que puedan estar presentes en el entorno del laboratorio. Las recomendaciones generales para reducir el riesgo de contaminación son las siguientes:
- Prepare su muestra de ADN, configure la mezcla de PCR, realice ciclos térmicos y analice los productos de PCR en áreas separadas.
- Configure las mezclas de PCR en una cabina de flujo laminar equipada con una lámpara UV.
- Utilice guantes nuevos para la purificación del ADN y la preparación de la reacción.
- Utilice contenedores de reactivos dedicados a la PCR. Utilice pipetas de desplazamiento positivo o utilice puntas de pipeta con filtros de aerosol para preparar muestras de ADN y realizar la configuración de la PCR.
- Realice siempre reacciones de “control sin ADN molde” (NTC) para comprobar si hay contaminación
Control de calidad
La ausencia de endodesoxirribonucleasas, exodesoxirribonucleasas y ribonucleasas se confirma mediante pruebas de calidad adecuadas. Probado funcionalmente en la amplificación de un gen de copia única de ADN genómico humano.
Almacenamiento
Este reactivo se puede almacenar a 4 ° C durante 2 meses y protegido de la luz. Para un almacenamiento más prolongado, este reactivo debe mantenerse a -20 ° C y protegido de la luz.
Nota
P4031 contiene suficientes reactivos adecuados para 40 reacciones de amplificación de 50 μl de sistema de PCR.
P4032 contiene suficientes reactivos adecuados para 200 reacciones de amplificación de 50 μl de sistema de PCR.
Protocolos
Volumen | 1 ml (P4031), 1 ml x 5 (P4032) |
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