ADN Polimerasa Pfu (P1081,P1082,P1083,P1084)
ADN Polimerasa Pfu (P1081,P1082,P1083,P1084)
Se ha demostrado que la ADN polimerasa Pfu, derivado del arqueo hipertermofilo Pyrococcus furiosus, exhibe propiedades de termoestabilidad y corrección de pruebas superiores en comparación con otras polimerasas termoestables. A diferencia de la ADN polimerasa Taq, la ADN polimerasa Pfu altamente termoestable posee una actividad de corrección de pruebas de exonucleasa de 3’ a 5’ que permite a la polimerasa corregir errores de incorporación errónea de nucleótidos. Esto significa que los fragmentos de PCR generados por la polimerasa de ADN de Pfu tendrán menos errores que los insertos de PCR generados por Taq. El uso de la ADN polimerasa de Pfu en sus reacciones de PCR da como resultado productos de PCR de extremos romos, que son ideales para la clonación en vectores de extremo romos. La ADN polimerasa de Pfu es superior para técnicas que requieren síntesis de ADN de alta fidelidad.
Contenido
| P1081 | |
| ADN Polimerasa Pfu (2.5U/μl) | 100 μl |
| 10 x Tampón Pfu (Mg2+ plus) | 1.25 ml |
| 6 x Tampón de Carga | 1 ml |
| P1082 | |
| ADN Polimerasa Pfu (2.5U/μl) | 100 μl |
| 10 x Tampón Pfu (Mg2+ plus) | 1.25 ml |
| 6 x Tampón de Carga | 1 ml |
| dNTPs (cada una 2.5 mM) | 1 ml |
| P1083 | |
| ADN Polimerasa Pfu (2.5U/μl) | 400 μl |
| 10 x Tampón Pfu (Mg2+ plus) | 1.25 ml x 2 |
| 6 x Tampón de Carga | 1 ml |
| P1082 | |
| Pfu DNA Polymerase (2.5U/μl) | 400 μl |
| 10 x Tampón Pfu (Mg2+ plus) | 1.25 ml x 2 |
| 6 x Tampón de Carga | 1 ml |
| dNTPs (cada una 2.5 mM) | 1 ml x2 |
Características
La actividad exonucleasa 2’-5’ proporciona una tasa de error baja
Una de las ADN polimerasas más termoestables conocidas
La falta de actividad de prolongación significa que no hay extremos 3’ sobresalientes indeseados
Óptimo para la clonación por PCR de extremos romos
Temperatura óptima cerca de 75 ºC 95% activo después de 1 hora de incubación a 98 ºC
Aplicaciones
PCR de alta fidelidad y reacciones de extensión de cebadores
Clonación por PCR y generación de productos de amplificación de extremos romos
Definición de Unidades
Una unidad se define como la cantidad de enzima requerida para catalizar la incorporación de 10 nM de dNTPs en una forma ácida-insoluble en 30 minutos a 70ºC empleando esperma de arenque como sustrato.
Tampón de Almacenamiento
Tris-HCl 20 mM (pH 8.0), KCl 100 mM, MgCl2 3 mM DTT 1 mM, NP-40 al 0,1%, Tween20 al 0,1%, BSA 0,2 mg / ml, glicerol al 50% (v / v)
Tampón 10X Pfu
Tris-HCl 200 mM PH8,8, KCl 100 mM, (NH4) 2SO4 100 mM, MgSO4 20 mM, Tritonx al 1%-100, 1 mg / ml BSA
Almacenamiento
Almacenar todos los contenidos a –20°C
Protocolo
P1081 Pfu DNA Polymerase – Protocol
P1082 Pfu DNA Polymerase – Protocol
| Cantidad | 250U (P1081), 250U con nucleótidos (P1082), 1000U (P1083), 1000U con nucleótidos (P1084) |
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