Kit de purificación de fragmentos de PCR y ADN (D1091,D1092)
Kit de purificación de fragmentos de PCR y ADN (D1091,D1092)
El kit de purificación de PCR está diseñado para una purificación de ADN rápida y eficiente a partir de productos de PCR u otras mezclas de reacciones enzimáticas. Este kit utiliza una tecnología propia basada en membranas de sílice en forma de columnas de centrifugación adecuadas, eliminando la necesidad de manipulaciones tediosas con resina o extracciones tóxicas con fenol o cloroformo. El kit elimina de forma efectiva los cebadores, dNTPs, nucleótidos marcados sin incorporar, enzimas y sales de la PCR u otras reacciones. Se puede usar el kit para la purificación de fragmentos de ADN desde 50 pb hasta 40 kb con una tasa de recuperación de hasta el 100%. Cada columna de purificación tiene una capacidad de unión de hasta 30 μg de ADN y el proceso completo tan solo dura 15 minutos. El ADN puro puede ser utilizado en distintos procesos tales como secuenciación, digestión por enzimas de restricción, etiquetado, ligamiento, clonación, transcripción in vitro, transferencia o hibridación in situ.
Contenido
| Contenido | D1091 (50preps) |
D1092 (100preps) |
| Solución BD | 20 ml | 40 ml |
| Solución PE | 15 ml | 15 ml x2 |
| Tampón de elución | 2.5 ml | 5 ml |
| Columna de centrifugación | 50 unidades | 100 unidades |
Almacenamiento
El kit puede ser almacenado hasta 12 meses a temperatura ambiente (15-25ºC) o a 4ºC para almacenar durante más de 12 meses. Si se forman precipitados en las soluciones de tampón pueden disolverse mediante incubación a 37ºC antes de su uso.
Principio
Una mezcla de reacción que contiene ADN se combina con un tampón de unión y se añade a una columna de purificación. Un agente caotrópico en este tampón desnaturaliza las proteínas y favorece la unión del ADN a la membrana de sílice de la columna. Como comodidad añadida, el buffer de unión contiene un indicador de color que permite una monitorización sencilla del pH de la solución para que la unión de ADN sea óptima. Las impurezas son eliminadas con un simple paso de lavado. Luego, el ADN purificado es eluido en la columna con el tampón de elución. El ADN recuperado está listo para su uso en diversos procesos.
Características
Elevada eficiencia: recuperación de 85-100% en un rango de 50 pb-40 kb.
Comodidad: las columnas de centrifugación están ensambladas y cerradas en tubos de recogida.
Rapidez: El proceso tarda 15 minutos
DNA puro: A260/A280= 1.7-1.9.
Aplicaciones
Purificación rápida y eficiente de fragmentos de ADN ideal para usar en procesos convencionales de biología molecular incluidos:
Digestión por enzimas de restricción
Secuenciación automática fluorescente o radioactiva
PCR
Transcripción in vitro
Control de calidad
El kit ha sido ensayado en la purificación de productos de PCR de 50 pb y 1 kb según el protocolo. La calidad del ADN purificada ha sido evaluada mediante espectrofotometría, mediante electroforesis con gel de agarosa, digestión con enzimas de restricción y secuenciación automática fluorescente.
Protocol
D1091 D1092 PCR and DNA Fragment purification Kit – Protocol
| Nº de preparaciones | 50 preps (D1091), 100 preps (D1092) |
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