Long Taq DNA Polymerase (P2081, P2082, P2083, P2084)
Long Taq DNA Polymerase (P2081, P2082, P2083, P2084)
La ADN polimerasa Long Taq, una combinación de dos ADN polimerasas termoestables, Taq y Pfu, es una formulación especial diseñada para amplificar fragmentos grandes. Se demostró que este Long Taq especialmente formulado amplifica plantillas largas del genoma del fago λ de hasta 20 kb. También es una mejor opción para amplificar secuencias complejas, como secuencias ricas en GC.
Long taq es puede reemplazar directamente a la polimerasa Taq normal en la mayoría de las aplicaciones. El uso de Long Taq en sus reacciones de PCR da como resultado productos de PCR de extremos cohesivos 3´-dA, que se pueden usars en la clonación TA.
Contenido
P2081
| Long Taq DNA Polymerase (5U/μL) | 50 μL |
| 10 x Long PCR Buffer I (Mg2+ Plus) | 1,25 ml |
| 10 x Long PCR Buffer II (Mg2+ Plus) | 1,25 ml |
| PCR Enhancer | 500 μL |
| 6 x Buffer de Carga | 1 ml |
P2082
| Long Taq DNA Polymerase (5U/μL) | 50 μL |
| 10 x Long PCR Buffer I (Mg2+ Plus) | 1,25 ml |
| 10 x Long PCR Buffer II (Mg2+ Plus) | 1,25 ml |
| PCR Enhancer | 500 μL |
| 6 x Buffer de Carga | 1 ml |
Con dNTPs
P2083
| Long Taq DNA Polymerase (5U/μL) | 200 μL |
| 10 x Long PCR Buffer I (Mg2+ Plus) | 1,25 ml x 2 |
| 10 x Long PCR Buffer II (Mg2+ Plus) | 1,25 ml x 2 |
| PCR Enhancer | 500 μL x2 |
| 6 x Buffer de Carga | 1 ml |
P2084
| Long Taq DNA Polymerase (5U/μL) | 200 μL |
| 10 x Long PCR Buffer I (Mg2+ Plus) | 1,25 ml x 2 |
| 10 x Long PCR Buffer II (Mg2+ Plus) | 1,25 ml x 2 |
| PCR Enhancer | 500 μL x2 |
| 6 x Buffer de Carga | 1 ml |
Con dNTPs
El tampón de PCR largo 10 × (Mg2 + Plus) se puede reemplazar con el tampón de PCR 10X (libre de Mg2 +) y MgCl2 25 mM. Elija el paquete adecuado para su experimento.
Aplicaciones
- Amplificación por PCR de fragmentos de ADN de hasta 20 kb
- Etiquetado de ADN
- Secuencia ADN
- PCR para clonación
Definición de Unidades
Una unidad se define como la cantidad de enzima requerida para catalizar la incorporación de 10 nM de dNTPs en una forma ácida-insoluble en 30 minutos a 70ºC empleando esperma de arenque como sustrato.
Tampón de Almacenamiento
TrisCl 20 mM (pH 8,0), KCl 100 mM, MgCl2 3 mM DTT 1 mM, NP-40 al 0,1%, Tween20 al 0,1%, BSA 0,2 mg / ml, glicerol al 50% (v / v)
Tampón Taq largo 10X Ⅰ con Mg2 +
Tris-HCl 500 mM pH 8.8, 160 mM (NH4) 2SO4, 25 mM MgCl2, 1% Triton X-100
Tampón Taq largo 10X Ⅱ con Mg2 + Tris-HCl
200 mM PH8,8, KCl 100 mM, (NH4) 2SO4 100 mM, MgSO4 16 mM, Tritonx-100 al 1%
Características
- Alta fidelidad: fidelidad 3 veces mayor que ADN polimerasa Taq.
- Fragmento más largo: amplifica secuencias largas hasta 20 kb.
- Amplificación de secuencias complejas (GC rica o secuencia repetitiva).
- Genera productos de PCR de extremos romos y 3′-dA.
Notas
- La ADN polimerasa Long Taq tiene dos concentraciones con 2,5 U / μl y 5 U / μl, el paquete predeterminado es 5 U / μl.
- 10xLong PCR Buffer: tampón clásico para Long Taq ADN polimerasa, es bueno para plantillas largas, especialmente por encima de 10 kb.
- 10xLong PCR Buffer Ⅱ es un buffer especial optimizado. Mejora la fidelidad, pero no es aconsejable para secuencias largas por encima de 10 kb.
- Los usuarios pueden elegir un tampón adecuado para diferentes plantillas.
Protocolo
| Nº Unidades | 250U (P2081), 250U con dNTPs (P2082), 1000U (P2083), 1000U con dNTPs (P2084) |
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