Long Taq Kit (P3011)
Long Taq Kit (P3011)
El kit 2XLong Taq es una solución premezclada y lista para usar que contiene polimerasa de ADN Long Taq, dNTP y tampón de reacción en concentraciones óptimas para la amplificación eficiente de las plantillas de ADN mediante PCR. En este kit, la ADN polimerasa Long Taq se almacena por separado de la mezcla de reacción de PCR. Para preparar la PCR final, mezcle la polimerasa y el tampón de reacción en la proporción adecuada y luego agregue los cebadores y el ADN molde necesarios. El kit Long Taq Mix contribuye a una PCR altamente reproducible al reducir el riesgo de errores de pipeteo, errores de cálculo y contaminación. También contribuye a una mayor sensibilidad al agregar potenciador. El uso del kit en su reacción de PCR da como resultado una mezcla de productos de PCR con extremos romos y 3′-dA que sobresalen.
Long taq DNA Polymerase, una combinación de DNA polimerasas termoestables, es una formulación especial diseñada para amplificar fragmentos grandes. Se demostró que esta Long taq especialmente formulada amplifica las plantillas largas del genoma del fago λ de hasta 20 kb. También es una mejor opción para amplificar secuencias complejas, como secuencias ricas en GC. Long taq es adecuado como reemplazo directo de la polimerasa Taq común en la mayoría de las aplicaciones. El uso de Long taq en sus reacciones de PCR da como resultado que 3´-dA sobresalga de los productos de PCR, que pueden usarse en la clonación TA.
Contenido
P3011
2 x Long Reaction Mix | 1 ml x 5 |
Long Taq DNA Polymerase (2,5U/ µl) | 160 µl |
PCR Enhancer | 500 µl x 3 |
2 × Mezcla de reacción larga
Tampón de PCR largo 2X, dNTP 0,4 mM, MgCl2 3,2 mM, azul de bromofenol al 0,02%.
Tampón de almacenamiento
Tris-HCl 20 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, KCl 100 mM, TW 20 al 0,5%, NP 40 al 0,5%, glicerol al 50%
Características
Conveniente: solo se necesita ADN molde y cebadores
Eficiencia: simplificando la operación y ahorrando su tiempo
Reproducible: reduce el riesgo de errores de pipeteo, errores de cálculo y contaminación
La cantidad de polimerasa es flexible y controlable.
Aplicaciones
PCR para plantillas largas de hasta 40 kb
Reacción de amplificación de alto rendimiento y alta reproducibilidad de plantillas complejas
Genere un producto de PCR para la clonación de TA
Definición de Unidades
Una unidad se define como la cantidad de enzima requerida para catalizar la incorporación de 10 nM de dNTPs en una forma ácida-insoluble en 30 minutos a 70ºC empleando esperma de arenque como sustrato.
Notas
- El sistema contiene suficientes reactivos adecuados para 200 reacciones de amplificación de 50 μl cada una.
- El producto tiene dos paquetes, uno contiene azul de bromofenol y el otro no. El paquete predeterminado contiene azul de bromofenol.
- La mezcla ya contiene MgCl2 4 mM, y proporcionamos otro MgCl2 25 mM, que se puede utilizar para optimizar la concentración de Mg2 + en su sistema de PCR.
Protocolo
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