Maxiprep para plásmidos de alta pureza por columna de sílice (D1051)
Maxiprep para plásmidos de alta pureza por columna de sílice (D1051)
Plasmid DNA Maxiprep Kit (High Purity, Silica-membrane Spin Column) está diseñado para una preparación rápida, económica y a pequeña escala de plásmidos de ADN de alta calidad a partir de cultivos recombinantes de E.coli. Este Kit utiliza una tecnología exclusiva de membrana basada en sílice en forma de columna centrifugación. Cada columna de centrifugación puede recuperar hasta 400-1,000 μg de ADN plasmídico a partir de 100 ml a partir de un cultivo bacteriano de la noche a la mañana. Además, este kit se puede utilizar para realizar de forma exitosa la purificación de plásmidos y cósmidos de cualquier tamaño de forma eficiente. El rendimiento del plásmido y el volumen óptimo para el cultivo depende del número de copias del plásmido y del medio usado en el cultivo.
Componentes
Componentes | D1051 (10 preps) |
ARNasa A (10 mg/ml) | 600 μl x2 |
Solución I | 100 ml |
Solución II | 100 ml |
Solución III | 120 ml |
Tampón de lavado PB | 120 ml |
Tampón de lavado W | 40 ml x 3 |
Tampón de elución | 20 ml |
Columnas de centrifugación | 10 unidades |
Características
Tiene contenido par ahacer hasta 10 preparaciones
Alto rendimiento: 100 ml de suspensión producen 400-1,000 μg de ADN plasmídico de alta calidad.
Alta pureza: A260/A280=1.7-1.9. sin cloroformo ni fenol, siendo así seguro para la gente.
Rapidez: la purificación dura tan solo 40 min.
Almacenamiento
ARNasa A: conservar a -20ºC. Antes de empezar, añadir la ARNasa A a la Solución I, mezclar bien y almacenar a 4ºC.
Los demás reactivos pueden conservarse a temperatura ambiente.
Si se forman precipitados en las soluciones de tampón durante su almacenamiento, se deben disolver mediante incubación a 37ºC antes de su uso.
Principio
Este método está basado en columnas de centrifugación con membranas de sílice, las partículas de sílice se unen al ADN de forma selectiva a altas concentraciones de sales y bajo pH, mientras que las proteínas y otros contaminantes se lavan para ser eliminadas. El ADN puro es eluido con tampón TE o agua. Este método requiere ciertas manipulaciones, y es más rápido y fácil de llevar a cabo que otros métodos de extracción orgánicos. El ADN purificado es apto para todos los procesos comunes de biología molecular, incluyendo digestión por enzimas de restricción, clonación, secuenciación, etc.
No hay valoraciones aún.