Maxiprep para plásmidos de alta pureza por columna de sílice (D1051)
Maxiprep para plásmidos de alta pureza por columna de sílice (D1051)
Plasmid DNA Maxiprep Kit (High Purity, Silica-membrane Spin Column) está diseñado para una preparación rápida, económica y a pequeña escala de plásmidos de ADN de alta calidad a partir de cultivos recombinantes de E.coli. Este Kit utiliza una tecnología exclusiva de membrana basada en sílice en forma de columna centrifugación. Cada columna de centrifugación puede recuperar hasta 400-1,000 μg de ADN plasmídico a partir de 100 ml a partir de un cultivo bacteriano de la noche a la mañana. Además, este kit se puede utilizar para realizar de forma exitosa la purificación de plásmidos y cósmidos de cualquier tamaño de forma eficiente. El rendimiento del plásmido y el volumen óptimo para el cultivo depende del número de copias del plásmido y del medio usado en el cultivo.
Componentes
| Componentes | D1051 (10 preps) |
| ARNasa A (10 mg/ml) | 600 μl x2 |
| Solución I | 100 ml |
| Solución II | 100 ml |
| Solución III | 120 ml |
| Tampón de lavado PB | 120 ml |
| Tampón de lavado W | 40 ml x 3 |
| Tampón de elución | 20 ml |
| Columnas de centrifugación | 10 unidades |
Características
Tiene contenido par ahacer hasta 10 preparaciones
Alto rendimiento: 100 ml de suspensión producen 400-1,000 μg de ADN plasmídico de alta calidad.
Alta pureza: A260/A280=1.7-1.9. sin cloroformo ni fenol, siendo así seguro para la gente.
Rapidez: la purificación dura tan solo 40 min.
Almacenamiento
ARNasa A: conservar a -20ºC. Antes de empezar, añadir la ARNasa A a la Solución I, mezclar bien y almacenar a 4ºC.
Los demás reactivos pueden conservarse a temperatura ambiente.
Si se forman precipitados en las soluciones de tampón durante su almacenamiento, se deben disolver mediante incubación a 37ºC antes de su uso.
Principio
Este método está basado en columnas de centrifugación con membranas de sílice, las partículas de sílice se unen al ADN de forma selectiva a altas concentraciones de sales y bajo pH, mientras que las proteínas y otros contaminantes se lavan para ser eliminadas. El ADN puro es eluido con tampón TE o agua. Este método requiere ciertas manipulaciones, y es más rápido y fácil de llevar a cabo que otros métodos de extracción orgánicos. El ADN purificado es apto para todos los procesos comunes de biología molecular, incluyendo digestión por enzimas de restricción, clonación, secuenciación, etc.
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