Pfu Kit (P2011)
Pfu Kit (P2011)
El Mix 2 x Pfu es una solución premezclada y lista para usar que contiene ADN polimerasa Pfu, dNTP, MgSO4 y tampón de reacción en concentraciones óptimas para 200 reacciones de amplificación de 50 μl cada una. Para preparar la PCR final, solo se agregan cebadores y ADN molde. El Mix Pfu contribuye a una PCR altamente reproducible al reducir el riesgo de errores de pipeteo, errores de cálculo y contaminación. También contribuye a una mayor sensibilidad al agregar intensificador y optimizador. El uso del kit en su reacción de PCR da como resultado productos de PCR de extremos romos.
Se ha demostrado que la ADN polimerasa Pfu, derivado del arqueo hipertermofilo Pyrococcus furiosus, exhibe propiedades de termoestabilidad y corrección de pruebas superiores en comparación con otras polimerasas termoestables. A diferencia de la ADN polimerasa Taq, la ADN polimerasa Pfu altamente termoestable posee una actividad de corrección de pruebas de exonucleasa de 3’ a 5’ que permite a la polimerasa corregir errores de incorporación errónea de nucleótidos. Esto significa que los fragmentos de PCR generados por la polimerasa de ADN de Pfu tendrán menos errores que los insertos de PCR generados por Taq. El uso de la ADN polimerasa de Pfu en sus reacciones de PCR da como resultado productos de PCR de extremos romos, que son ideales para la clonación en vectores de extremo romos. La ADN polimerasa de Pfu es superior para técnicas que requieren síntesis de ADN de alta fidelidad.
Contenidos
P3022 | |
2 X Pfu Reaction Mix | 1 ml x 5 |
ADN Polimerasa Pfu (2,5 U/µl) | 160 µl |
Mezcla de reacción 2 × Pfu Tampón 2xPfu, dNTP 0,4 mM, MgSO4 4 mM, azul de bromofenol al 0,02%
Características
Conveniente: sólo se necesitan cebadores y ADN molde
Eficiente: simplifica la operación y ahorra su tiempo
Reproducible: reduce el riesgo de errores de pipeteo, errores de cálculo y contaminación Flexible: la cantidad de polimerasa es flexible y controlable
Aplicaciones
PCR rutinarias de alto rendimiento y alta reproducibilidad
PCR de alta fidelidad
Definición de Unidades
Una unidad se define como la cantidad de enzima requerida para catalizar la incorporación de 10 nM de dNTPs en una forma ácida-insoluble en 30 minutos a 70ºC empleando esperma de arenque como sustrato.
Tampón de Almacenamiento
20 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5 % TW 20, 0.5 % NP 40, 50 % Glycerol
Notas
- El sistema contiene suficientes reactivos adecuados para 200 reacciones de amplificación de 50 μl cada una.
- El producto tiene dos paquetes, uno contiene azul de bromofenol y el otro no. El paquete predeterminado contiene azul de bromofenol.
- La mezcla ya contiene 4 mM de MgCl2, y proporcionamos otros 25 mM de MgCl2, esto se puede utilizar para optimizar la concentración de Mg2 + en su sistema de PCR.
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