Pfu Kit (P2011)

120 €

El kit Pfu contiene una  ADN polimerasa pfu y 2 x una mezcla de reacción pfu premezclada lista para usar. La mezcla de reacción pfu se suministra como 2x de una solución concentrada, que contiene dNTP y todos los demás componentes de la PCR, excepto la plantilla de ADN y los cebadores. Para preparar la PCR final, mezcle la ADN polimerasa pfu y la mezcla de acción pfu, luego agregue el cebador y la plantilla. La mezcla de reacción contribuye a una alta especificidad al optimizar el sistema y reducir la tasa de cebador-dímero. La sensibilidad de la amplificación por PCR  es controlable debido a que la cantidad de ADN polimerasa pfu es flexible.

 

Se ha demostrado que la ADN polimerasa Pfu, derivado del arqueo hipertermofilo Pyrococcus furiosus, exhibe propiedades de termoestabilidad y corrección de pruebas superiores en comparación con otras polimerasas termoestables. A diferencia de la ADN polimerasa Taq, la ADN polimerasa Pfu altamente termoestable posee una actividad de corrección de pruebas de exonucleasa de 3’ a 5’ que permite a la polimerasa corregir errores de incorporación errónea de nucleótidos. Esto significa que los fragmentos de PCR generados por la polimerasa de ADN de Pfu tendrán menos errores que los insertos de PCR generados por Taq. El uso de la ADN polimerasa de Pfu en sus reacciones de PCR da como resultado productos de PCR de extremos romos, que son ideales para la clonación en vectores de extremo romos. La ADN polimerasa de Pfu es superior para técnicas que requieren síntesis de ADN de alta fidelidad.

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Contenido
2 X Pfu Reaction Mix 1 ml x 5
ADN Polimerasa Pfu (2,5 U/µl) 160 µl

 

Tampón de Almacenamiento
  • 20 mM Tris-HCl
  • 1 mM DTT
  • 0.1 mM EDTA
  • 100 mM KCl
  • 0.5 % TW 20
  • 0.5 % NP 40
  • 50 % Glicerol

 

2X Pfu Reaction Mix
  • 2x tampón Pfu
  • dNTP 0,4 mM
  • MgSO4 4 mM
  • Azul de bromofenol al 0,02%

 

Características
  • Conveniente: sólo se necesitan cebadores y ADN molde
  • Eficiente: simplifica la operación y ahorra su tiempo
  • Reproducible: reduce el riesgo de errores de pipeteo, errores de cálculo y contaminación
  • Flexible: la cantidad de polimerasa es flexible y controlable

 

Aplicaciones
  • Amplificación por PCR de fragmentos de ADN de hasta 5 kb.
  • Etiquetado de ADN
  • Secuencia ADN
  • PCR para clonación

 

Almacenamiento

Conservar a -20ºC

 

Notas
  • El sistema contiene suficientes reactivos adecuados para 200 reacciones de amplificación de 50 μl cada una.
  • El producto tiene dos paquetes, uno contiene azul de bromofenol y el otro no. El paquete predeterminado contiene azul de bromofenol.
  • La mezcla ya contiene 4 mM de MgCl2, y proporcionamos otros 25 mM de MgCl2, esto se puede utilizar para optimizar la concentración de Mg2+ en su sistema de PCR.

 

Protocolo

P2011 Pfu Kit – Protocol

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