Proteinasa K (Solución) (20mg/ml) (D2091)

30 €

La proteinasa K es una proteasa endolítica que escinde los enlaces peptídicos de los lados carboxílicos de los aminoácidos alifáticos, aromáticos o hidrofóbicos.

La proteinasa K se clasifica como serina proteasa. El péptido más pequeño hidrolizado por esta enzima es un tetrapéptido.

Detalles del producto

Almacenamiento a -20ºC

Tamaño 1 ml

Características

Solución lista para usar.

Activo en una amplia gama de productos de reacción.

Aplicaciones

Aislamiento de ADN genómico de cúlulas y tejidos cultivados.

Eliminación de ADNasas y ARNasas al aislar ADN y ARN de tejidos o líneas celulares.

Determinación de la localización enzimática.

Mejora de la eficacia de la clonación de productos de PCR

 

Control de calidad

Se ha confirmado por las pertinentes pruebas de calidad la ausencia de endo-, exodesoxirribonucleasas y ribonucleasas.

 

Concentración

20 mg/ml

 

Fuente

Células de Pichi pastoris con un gen clonado que codifica la proteasa endolítica de Tritirachium album (Proteinasa K).

Peso molecular

28,9 kDa el monómero (6).

 

Definición de unidad de actividad

La enzima libera aminoácidos y péptido y aminoácido Folin-positivos correspondientes a 1 µmol de tirosina en 1 min a 37 ° C utilizando hemoglobina desnaturalizada como sustrato. La actividad enzimática se determina en la siguiente mezcla: fosfato de potasio 0,08 M ​​(pH 7,5), urea 5 M NaCl 4 mM, CaCl2 3 mM y hemoglobina 16,7 mg / ml.

Tampón de almacenamiento

La enzima se envía en: Tris-HCl 50 mM (pH 7,5), que contiene cloruro cálcico 5 mM y glicerol al 50% (v / v).

 

Inhibición e inactivación

La proteinasa K no se inactiva por quelantes de metales, por reactivos con tiol ni por inhibidores específicos de tripsina y quimiotripsina.

 

Inactivado por calentamiento a 95ºC durante 10 minutos.

Nota

Actividad óptima de 50-55ºC.

La desnaturalización rápida de la enzima ocurre a temperaturas superiores a 65ºC.

La concentración de trabajo recomendada para la proteinasa K es de 0,05 a 1 mg/ml. La actividad de la enzima se estimula con SDS al 0,2-1% o con urea 1-4 M.

El Ca2+ protege la proteinasa K contra la autolisis, aumenta la estabilidad térmica y tiene una función reguladora para el sitio de unión al sustrato de la proteinasa K.

 

Estable en un amplio rango de pH: 4,0-12,5 ; pH óptimo 7,5-8,0.

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